רנאַסע ינכיבאַטער

Aאַפּלאַקיישאַן

דער פּראָדוקט קענען זיין וויידלי געניצט אין קיין עקספּערימענט ווו רנאַסע ינטערפיראַנס איז מעגלעך צו ויסמיידן רנאַ דערנידעריקונג, אַזאַ ווי:

1.סינטעז פון דער ערשטער שנירל פון cDNA, RT-PCR, RT-qPCR, עטק.

2.פּראַטעקץ רנאַ פון דערנידעריקונג בעשאַס אין וויטראָ טראַנסקריפּציע / איבערזעצונג (למשל, אין וויטראָ וויראַל רעפּלאַקיישאַן סיסטעם).

3.ינאַבישאַן פון רנאַסע טעטיקייט בעשאַס רנאַ צעשיידונג און רייניקונג.

סטאָרידזש טנאָים

דער פּראָדוקט קענען זיין סטאָרד ביי -25-15 ℃, גילטיק פֿאַר 2 יאָר.

סטאָרידזש באַפער

50 מם קקל, 20 מם העפּעס-קאָה (pH 7.6, 25 ℃), 8 מם דטט און 50% גליסעראָל.

אַפּאַראַט דעפֿיניציע

די סומע פון ​​​​מורין רנאַסע ינכיבאַטער פארלאנגט צו ינכיבאַט די טעטיקייט פון 5 נג פון ריבאָנוקלעאַסע א מיט 50% איז דיפיינד ווי איין אַפּאַראַט (ו).

מאָלעקולאַר וואָג פון פּראָטעין

די מאָלעקולאַר וואָג פון מיורינע רנאַסע ינכיבאַטער איז 50 kDa.

קוואַליטעט קאָנטראָל

עקסאָנוקלאַסע אַקטיוויטעט: 

40 ו פון מיורינע רנאַסע ינכיבאַטער מיט 1 μג λ -הינדריי דיידזשעסטיד דנאַ ביי 37 ℃ פֿאַר 16 שעה ייעלדס קיין דערנידעריקונג ווי באשלאסן דורך אַגאַראָסע געל עלעקטראָפאָרעסיס.
ענדאָנוקלעאַסע אַקטיוויטעט: 

40 ו פון מורין רנאַסע ינכיבאַטער מיט 1μ ג λ דנאַ ביי 37 ℃ פֿאַר 16 שעה ייעלדס קיין דערנידעריקונג ווי באשלאסן דורך אַגאַראָסע געל עלעקטראָפאָרעסיס.

ניקינג אַקטיוויטעט: 

40U פון מורין רנאַסע ינכיבאַטער מיט 1μ ג pBR322 ביי 37 ℃ פֿאַר 16 שעה ייעלדס קיין דערנידעריקונג ווי באשלאסן דורך אַגאַראָסע געל עלעקטראָפאָרעסיס.

רנאַסע אַקטיוויטעט: 

40U פון מורין רנאַסע ינכיבאַטער מיט 1.6μ ג MS2 רנאַ פֿאַר 4 שעה ביי 37 ℃ ייעלדס קיין דערנידעריקונג ווי באשלאסן דורך אַגאַראָסע געל עלעקטראָפאָרעסיס.

E.coli DNA:

40 ו פון מורין רנאַסע ינכיבאַטער איז סקרינד פֿאַר די בייַזייַן פון E. קאָלי גענאָמיק דנאַ ניצן TaqMan qPCR מיט פּרימערז ספּעציפיש פֿאַר די E. קאָלי 16S רRNA לאָקוס.די E. קאָלי גענאָמיק דנאַ קאַנטאַמאַניישאַן איז ≤ 0.1 פּג / 40 ו.

Nאָטעs

1.וויאָלענט אַסאַליישאַן אָדער סטערינג וועט פירן צו ענזיים ינאַקטיוויישאַן.

2. די אָפּטימום טעמפּעראַטור קייט פון דעם ינכיבאַטער איז געווען 25-55 ℃, און עס איז ינאַקטיווייטיד ביי 65 ℃ און העכער.

3. די אַקטיוויטעטן פון רנאַסע ה, רנאַסע 1 און רנאַסע ט 1 זענען נישט ינכיבאַטיד דורך מורינע רנאַסע ינכיבאַטער.

4. די ינאַבישאַן פון רנאַסע טעטיקייט איז געפונען אין אַ ברייט קייט פון ף (pH 5-9 זענען אַלע אַקטיוו), און די העכסטן טעטיקייט איז באמערקט ביי ף 7-8.

5. זינט ריבאָנוקלעאַסעס טיפּיקלי ריטיין אַקטיוויטעט אונטער דענאַטורינג טנאָים, זאָרג מוזן זיין גענומען צו ויסמיידן דינאַטורינג רנאַסע ינכיבאַטער מאַלאַקיולז וואָס האָבן קאַמפּלעקסירט מיט אַ ריבאָנוקלאַסע.צו פאַרמייַדן די מעלדונג פון אַקטיוו ריבאָנוקלעאַסע, טעמפּעראַטורעס העכער ווי 50 °C און הויך קאַנסאַנטריישאַנז פון ורעאַ אָדער אנדערע דענאַטורינג אגענטן זאָל זיין אַוווידיד.