רנאַסע א
ריבאָנוקלעאַסע א (רנאַסעאַ) איז אַ איין-סטראַנדיד פּאָליפּעפּטידע מיט 4 דיסולפידע קייטן מיט אַ מאָלעקולאַר וואָג פון וועגן 13.7 kDa.רנאַסע א איז אַן ענדאָריבאָנוקלעאַסע וואָס ספּאַסיפיקלי דיגרייד איין-סטראַנדיד רנאַ ביי C און U רעזאַדוז.ספּאַסיפיקלי, די קלעאַוואַגע אנערקענט די פאָספאָדיעסטער בונד געשאפן דורך די 5′-ריבאָסע פון אַ נוקלעאָטידע און די פאָספאַטע גרופּע אויף די 3'-ריבאָסע פון די שכייניש פּירימידינע נוקלעאָטידע, אַזוי אַז די 2, 3'-סיקליק פאָספאַטעס זענען כיידראַלייזד צו די קאָראַספּאַנדינג 3. ′נוקלעאָסידע פאָספאַטעס (למשל pG-pG-pC-pA-pG איז קלעאַוועד דורך רנאַסע א צו דזשענערייט pG-pG-pCp און A-PG).רנאַסע א איז די מערסט אַקטיוו אין קלעווינג איין-סטראַנדיד רנאַ.רעקאַמענדיד ארבעטן קאַנסאַנטריישאַן איז 1-100μג / מל, קאַמפּאַטאַבאַל מיט פאַרשידן אָפּרוף סיסטעמען.נידעריק זאַלץ קאַנסאַנטריישאַן (0-100 מם נאַקל) קענען ווערן גענוצט צו שנייַדן איין-סטראַנדיד רנאַ, טאָפּל-סטראַנדיד רנאַ און רנאַ קייטן געשאפן דורך רנאַ-דנאַ כייברידיזיישאַן.אָבער, ביי הויך זאַלץ קאַנסאַנטריישאַן (≥0.3 ם), רנאַסע א בלויז ספּאַסיפיקלי קלעאַווז איין-סטראַנדיד רנאַ.
רנאַסע א איז מערסט קאַמאַנלי געניצט צו באַזייַטיקן רנאַ בעשאַס דער צוגרייטונג פון פּלאַסמיד דנאַ אָדער גענאָמיק דנאַ. צי דנאַסע איז אַקטיוו בעשאַס דער צוגרייטונג פּראָצעס קענען לייכט ווירקן די אָפּרוף.דער טראדיציאנעלער מעטאָד פון בוילינג אין אַ וואַסער וואַנע קענען זיין געניצט צו ינאַקטיווייט די DNase טעטיקייט.דער פּראָדוקט טוט נישט אַנטהאַלטן דנאַסע און פּראָטעאַסע, און טוט נישט דאַרפן היץ באַהאַנדלונג איידער נוצן.אין אַדישאַן, דעם פּראָדוקט קענען אויך זיין געניצט אין מאָלעקולאַר ביאָלאָגי יקספּעראַמאַנץ אַזאַ ווי רנאַסע שוץ אַנאַליסיס און רנאַ סיקוואַנס אַנאַליסיס.
סטאָרידזש טנאָים
דער פּראָדוקט קענען זיין סטאָרד ביי -25-15 ℃, גילטיק פֿאַר 2 יאָר.
אינסטרוקציעס
דאָס איז איינער פון די פּראָסט מעטהאָדס פֿאַר פּריפּערינג RNase א סטאָרידזש לייזונג.עס קענען אויך זיין צוגעגרייט דורךאנדערע מעטהאָדס לויט די טראדיציאנעלן מעטהאָדס אין דער לאַבאָראַטאָריע אָדער רעפֿערענץ ליטעראַטור (אַזאַ וויגלייך צעלאָזן אין 10 מם טריס-הקל, pH 7.5 אָדער טריס-נאַקל לייזונג)
1. ניצן 10 מם סאָדיום אַסאַטייט (pH 5.2) צו צוגרייטן 10 מג / מל פון רנאַסע א סטאָרידזש לייזונג
2. באַהיצונג בייַ 100 ℃ פֿאַר 15 מין
3. קיל צו צימער טעמפּעראַטור, לייגן 1/10 באַנד פון 1 M Tris-HCl (pH 7.4), סטרויערן די ף צו 7.4 (פֿאַרלמשל, לייגן 500 מל פון 10 ג / מל רנאַסע סטאָרידזש לייזונג 1M Tris-HCL, PH7.4)
4. סאַב-פּאַקידזשד ביי -20 ℃ פֿאַר פאַרפרוירן סטאָרידזש, וואָס קענען זיין סטאַביל פֿאַר אַרויף צו 2 יאָר.
[נאָטעס]: ווען בוילינג רנאַסעאַ לייזונג אונטער נייטראַל טנאָים, רנאַסע אָפּזאַץ וועט פאָרעם;קאָכן עס ביי אַ נידעריקער ף, און אויב עס איז אָפּזאַץ, עס קענען זיין באמערקט, וואָס קען זיין געפֿירט דורך דעם בייַזייַן פון פּראָטעין ימפּיוראַטיז.אויב אָפּזאַץ איז געפֿונען נאָך בוילינג, ימפּיוראַטיז קענען זיין אַוועקגענומען דורך הויך-גיכקייַט סענטריפוגאַטיאָן (13000 רפּם), און דעמאָלט סאַב-פּאַקט פֿאַר ייַז קאַלט סטאָרידזש.
פּראָדוקט אינפֿאָרמאַציע
| סינאָנימס | ריבאָנוקלאַסע איך;פּאַנקרעאַטיק ריבאָנוקלעאַסע;ריבאָנוקלאַסע 3'-פּירימידנאָאָליגאָנוקלעאָטידאָהידראָלאַסע;רנאַסע א;ענדאָריבאָנולסאַסע I |
| CAS No. | 9001-99-4 |
| אויסזען | ווייַס ליאָפילייזד פּודער |
| מאָלעקולאַר וואָג | ~ 13.7 קדאַ (אַמינאָ זויער סיקוואַנס) |
| Ph ווערט | 7.6 (אַקטיוויטעט קייט 6-10) |
| פּאַסיק טעמפּעראַטור | 60 ℃ (אַקטיוויטעט קייט 15-70 ℃) |
| אַקטאַווייטינג אַגענט | Na2+.ק+ |
| ינכיבאַטער | רנאַסע ינכיבאַטער |
| ינאַקטיוואַטיאָן אופֿן | קענען ניט ינאַקטיווייטיד דורך באַהיצונג, עס איז סאַגדזשעסטיד צו נוצן סענטריפודזש זייַל |
| אָריגין | באָווין |
| סאָלוביליטי | סאַליאַבאַל אין וואַסער (10 מג / מל) |
| אָנווער אויף טרוקן | ≤5.0% |
| ענזיים טעטיקייט | ≥60 קוניץ וניץ / מג |
| יסאָעלעקטריק פונט | 9.6 |
הערות
פֿאַר דיין זיכערקייַט און געזונט, ביטע טראָגן לאַב רעק און דיספּאָוזאַבאַל גלאַווז פֿאַר אָפּעראַציע.
