UDG/UNG ענזימעס
UDG (וראַסיל דנאַ גלייקאָסילאַסע) קענען קאַטאַליזירן די כיידראַלאַסאַס פון די N-גלייקאָסידיק פֿאַרבינדונג צווישן די וראַסיל באַזע און די צוקער-פאָספאַטע באַקבאָון אין ssDNA און dsDNA.עס קענען לייכט קאָנטראָלירן אַעראָסאָל פאַרפּעסטיקונג און איז פּאַסיק פֿאַר פּראָסט מאָלעקולאַר ביאָלאָגי סיסטעמען אַזאַ ווי PCR, qPCR, RT-qPCR און LAMP.
ספּעסאַפאַקיישאַנז
| עקספּרעססיאָן האָסט | רעקאָמבינאַנט י קאָלי מיט וראַסיל דנאַ גלייקאָסילאַסע דזשין |
| מאָלעקולאַר וואָג | 24. 8קדאַ |
| ריינקייַט | ≥95% (SDS-PAGE) |
| היץ ינאַקטיוואַטיאָן | 95 ℃, 5 ~ 10 מין |
| אַפּאַראַט דעפֿיניציע | איין אַפּאַראַט (ו) איז דיפיינד ווי די סומע פון ענזיים וואָס איז פארלאנגט צו קאַטאַליזירן די כיידראַלאַסאַס פון 1 μג דו-מיט דסדנאַ אין 30 מינוט ביי 25 ℃. |
סטאָרידזש
דער פּראָדוקט זאָל זיין סטאָרד ביי -25 ℃ ~ -15 ℃ פֿאַר צוויי יאָר.
אינסטרוקציעס
1.צוגרייטונג פון די PCR אָפּרוף געמיש לויט די פאלגענדע סיסטעם
| קאַמפּאָונאַנץ | באַנד (μL) | לעצט קאַנסאַנטריישאַן |
| 10 × פּקר באַפער (מג² + פּלוס) | 5 | 1× |
| 25 ממאָל / למגקל | 3 | 1.5 ממאָל / ל |
| דוטפּ (10 ממאָל / ל) | 3 | 0.6 ממאָל / ל |
| dCTP/dGTP/dATP/dTTP (10 ממאָל / ליטש) | 1 | 0.2 ממאָל / ליטש |
| מוסטער דנאַ | X | - |
| אָנפאַנגער 1 (10 μמאָל/ל) | 2 | 0.4 μמאָל/ל |
| אָנפאַנגער 2 (10 μמאָל/ל) | 2 | 0.4 μמאָל/ל |
| טאַק דנאַ פּאָלימעראַסע (5 ו / μ ל) | 0. 5 | 0. 05 ו / μ ל |
| וראַסיל דנאַ גליקאָסילאַסע (ודג / ונג), קסנומקס ו / μל | 1 | 1 ו / μ ל |
| ddH₂O | אַרויף צו 50 | - |
נאטיץ: לויט די יקספּערמענאַל רעקווירעמענץ, די לעצט קאַנסאַנטריישאַן פון דוטפּ קענען זיין אַדזשאַסטיד צווישן 0.2-0.6 ממאָל / ל, און 0.2 ממאָל / ל דטטפּ קענען זיין מוסיף סאַלעקטיוולי.
2.אַמפּלאַפאַקיישאַן פּראָצעדור
| ציקל שריט | טעמפּעראַטור | צייַט | סייקאַלז |
| דו-מיט טעמפּלאַטע דערנידעריקונג | 25℃ | 10 מינס | 1 |
| UDG אַקטאַוויישאַן, ערשט דענאַטוראַטיאָן מוסטער | 95℃ | 5 ~ 10 מינוט | 1 |
| דענאַטוראַטיאָן | 95℃ | 10 סעק |
30-35 |
| אַנילינג | 60℃ | 20 סעק | |
| פאַרלענגערונג | 72℃ | 30 סעק / קב | |
| לעצט פאַרלענגערונג | 72℃ | 5 מין | 1 |
נאטיץ: דער אָפּרוף צייט ביי 25 ° C קענען זיין אַדזשאַסטיד אין 5-10 מינוט לויט די יקספּערמענאַל רעקווירעמענץ.
הערות
1.UDG איז אַקטיוו אין רובֿ PCR אָפּרוף באַפערז.
2.ענזימעס זאָל זיין סטאָרד אין אַ ייסבאָקס אָדער אויף אַן אייז וואַנע ווען געוויינט, און זאָל זיין סטאָרד בייַ -20 ° C מיד נאָך נוצן.
3.ביטע טראָגן די נייטיק פּפּע, אַזאַ לאַב מאַנטל און גלאַווז, צו ענשור דיין געזונט און זיכערקייַט!
