מולטיפּלעקס קפּקר פּראָבע פּרעמיקס
קאַט נומ: HCB5051A
TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (Dye Based) איז אַ פאַר-לייזונג פֿאַר 2 × פאַקטיש-צייט קוואַנטיטאַטיווע פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן קעראַקטערייזד דורך הויך סענסיטיוויטי און ספּעסיפיקאַטי, וואָס איז בלוי אין קאָלירן און האט די ווירקונג פון מוסטער אַדישאַן.דער פּראָדוקט איז אַ 2 × מיקס פאַר-געמישט רייידזשאַנט וואָס ינייבאַלז אַרויף צו פיר פלורעסאַנט קוואַנטיטאַטיווע פּקר ריאַקשאַנז אין אַ איין אָפּרוף געזונט.דער פּראָדוקט כּולל די דזשאַנעטיקלי מאַדאַפייד אַנטיבאָדי מעטאַד צו הייס-אָנהייב טאַק ענזיים, זייער ימפּרוווינג די סענסיטיוויטי און ספּעציפֿישקייט פון אַמפּלאַפאַקיישאַן.אין דער זעלביקער צייַט, דעם פּראָדוקט האט דיפּלי אָפּטימיזעד די מולטי-רעאַקציע באַפער, וואָס קענען פֿאַרבעסערן די אַמפּלאַפאַקיישאַן עפעקטיווקייַט פון דער אָפּרוף און העכערן די עפעקטיוו אַמפּלאַפאַקיישאַן פון נידעריק-קאַנסאַנטריישאַן טעמפּלאַטעס.דער פּראָדוקט קענען זיין געוויינט פֿאַר גענאַטיפּינג און מולטיפּלעקס קוואַנטיטאַטיווע אַנאַליסיס.
ספּעציפיקאַציע
הייס אָנהייב | געבויט-אין הייס אָנהייב |
דעטעקשאַן אופֿן | אָנפאַנגער-זאָנד דיטעקשאַן |
פּקר אופֿן | qPCR |
פּאָלימעראַסע | טאַק דנאַ פּאָלימעראַסע |
טיפּ פון מוסטער | דנאַ |
סטאָרידזש טנאָים
דער פּראָדוקט איז שיפּט מיט טרוקן ייַז און קענען זיין סטאָרד ביי -25 ~ -15 ℃ פֿאַר 2 יאָר.
אינסטרוקציעס
1. אָפּרוףסיסטעם
קאַמפּאָונאַנץ | באַנד (μL) | לעצט קאַנסאַנטריישאַן |
2 × טאַקמאַן מולטיפּלעקס קפּקר האר מיקס | 12.5 | 1× |
אָנפאַנגער מישן (10 μמאָל / ל) a | × | 0.1 - 0.5 μמאָל/ל |
זאָנד מישן (10 μמאָל / ל)b | × | 50-250 nmol/L |
ראָקס רעפֿערענץ פאַרב | 0.5 | 1× |
מוסטער דנאַ / קדנאַ | 1-10 | - |
ddH2O | אַרויף צו 25 | - |
הערות:מישן ונ דורך איידער נוצן צו ויסמייַדן יבעריק באַבאַלז פון קראַפטיק שאַקינג.
א.אָנפאַנגער קאַנסאַנטריישאַן: אָנפאַנגער מיקס כּולל קייפל פּערז פון אָנפאַנגער, יוזשאַוואַלי יעדער אָנפאַנגער מיט אַ לעצט קאַנסאַנטריישאַן פון 0.2 μמאָל / ל און קענען אויך זיין אַדזשאַסטיד צווישן 0.1 און 0.5 μמאָל / ל ווי צונעמען.
ב.זאָנד קאַנסאַנטריישאַן: זאָנד מיקס כּולל קייפל פּראָבעס מיט פאַרשידענע פלואָרעססענסע סיגנאַלז, און די קאַנסאַנטריישאַן פון יעדער זאָנד קענען זיין אַדזשאַסטיד צווישן 50 און 250 נמאָל / ל לויט צו ספּעציפיש סיטואַציע.
1.ראָקס פאַרב רעפֿערענץ: עס איז געניצט אויף פאַקטיש צייט פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן קיילע אַזאַ ווי אַפּפּליעד ביאָסיסטעמס צו ריכטיק די טעות פון פלורעסאַנס סיגנאַל דזשענערייטאַד צווישן וועלז;דעם פּראָדוקט טוט נישט אַנטהאַלטן ראָקס פאַרב רעפֿערענץ.קאַס # 10200 איז רעקאַמענדיד אויב דארף.
2.מוסטער דיילושאַן: qPCR איז העכסט שפּירעוודיק, און עס איז רעקאַמענדיד צו צעפירן די מוסטער פֿאַר נוצן.אויב דער מוסטער איז אַ קדנאַ לאַגער לייזונג, די טעמפּלאַטע באַנד זאָל נישט יקסיד 1/10 פון די גאַנץ באַנד.
3.אָפּרוף סיסטעם: 25μL, 30μL אָדער 50μL איז רעקאַמענדיד צו ענשור די יפעקטיוונאַס און ריפּיטאַביליטי פון ציל דזשין אַמפּלאַפאַקיישאַן.
4.סיסטעם צוגרייטונג: ביטע צוגרייטן אין די סופּער ריין באַנק, און נוצן די עצות און אָפּרוף טובז אָן נוקלעאַסע רעזאַדו;עס איז רעקאַמענדיד צו נוצן די עצות מיט פילטער קאַרטראַדזשאַז.ויסמיידן קרייַז קאַנטאַמאַניישאַן און אַעראָסאָל קאַנטאַמאַניישאַן.
2.אָפּרוף פּראָגראַם
ציקל שריט | טעמפּ. | צייַט | סייקאַלז |
ערשט-דענאַטוראַטיאָן | 95 ℃ | 5 מינס | 1 |
דענאַטוראַטיאָן | 95 ℃ | 15 סעק | 45 |
אַנילינג / עקסטענסיאָן | 60 ℃ | 30 סעק |
הערות:
1.אַנילינג / פאַרלענגערונג: די טעמפּעראַטור און צייט קענען זיין אַפּראָופּרייטלי אַדזשאַסטיד לויט די דיזיינד אָנפאַנגער טם ווערט.
2.אַקוואַזישאַן פון פלואָרעססענסע סיגנאַל: די אַקוואַזישאַן פון פלואָרעססענסע סיגנאַל פארלאנגט פֿאַר פאַרשידענע קפּקר דיטעקשאַן ינסטראַמאַנץ איז אַנדערש, ביטע שטעלן די מינימום צייט לימיט.די צייט פון עטלעכע פּראָסט ינסטראַמאַנץ איז באַשטימט ווי גייט:
20 סעק: אַפּפּליעד ביאָסיסטעמס 7700, 7900HT, 7500 Fast
31 סעק: אַפּפּליעד ביאָסיסטעמס 7300
32 סעק: אַפּפּליעד ביאָסיסטעמס 7500
הערות
ביטע טראָגן די נייטיק פּפּע, אַזאַ לאַב מאַנטל און גלאַווז, צו ענשור דיין געזונט און זיכערקייַט!