וויראַל דנאַ / רנאַ עקסטראַקטיאָן קיט
דעם קיט איז פּאַסיק פֿאַר די גיך יקסטראַקשאַן פון הויך-ריינקייט וויראַל דנאַ / רנאַ פון סאַמפּאַלז אַזאַ ווי נאַסאָפאַרינגעאַל סוואַבז, ינווייראַנמענאַל סוואַבז, צעל קולטור סופּערנאַטאַנץ און געוועב האָמאָגענאַטע סופּערנאַטאַנץ.די קיט איז באזירט אויף סילאַקאַ מעמבראַנע רייניקונג טעכנאָלאָגיע וואָס ילימאַנייץ די נויט פֿאַר ניצן פענאָל / טשלאָראָפאָרם אָרגאַניק סאָלוואַנץ אָדער צייט-קאַנסומינג אַלקאָהאָל אָפּזאַץ צו עקסטראַקט וויראַל דנאַ / רנאַ פון הויך קוואַליטעט.די נוקלעיק אַסאַדז באקומען זענען פריי פון ימפּיוראַטיז און גרייט פֿאַר נוצן אין דאַונסטרים יקספּעראַמאַנץ אַזאַ ווי פאַרקערט טראַנסקריפּציע, פּקר, רט-פּקר, פאַקטיש-צייט פּקר, ווייַטער-דור סיקוואַנסינג (נגס), און נאָרדערן בלאָט.
סטאָרידזש טנאָים
קראָם ביי 15 ~ 25 ℃ און אַריבערפירן אין צימער טעמפּעראַטור
קאַמפּאָונאַנץ
| קאַמפּאָונאַנץ | 100RXNS |
| Buffer VL | 50 מל |
| Buffer RW | 120 מל |
| RNase-free ddH2 O | 6 מל |
| פאַסטפּורע רנאַ קאָלומנס | 100 |
| זאַמלונג טובז (2 מל) | 100 |
| רנאַסע-פריי זאַמלונג טובז (1.5 מל) | 100 |
Buffer VL:צושטעלן אַ סוויווע פֿאַר ליסיס און ביינדינג.
Buffer RW:אַראָפּנעמען ריזידזשואַל פּראָטעינס און אנדערע ימפּיוראַטיז.
RNase-free ddH2O:עליוט דנאַ / רנאַ פון די מעמבראַנע אין די ומדריי זייַל.
FastPure RNA שפאלטן:ספּעציעל אַדסאָרב דנאַ / רנאַ.
זאַמלונג טובז 2 מל:קלייַבן פילטראַטע.
רנאַסע-פריי זאַמלונג טובז 1.5 מל:קלייַבן דנאַ / רנאַ.
אַפּפּליקאַטיאָנס
נאַסאָפאַרינגעאַל סוואַבז, ינווייראַנמענאַל סוואַבז, צעל קולטור סופּערנאַטאַנץ און געוועב כאָומאַדזשאַנייט סופּערנאַטאַנץ.
זיך-צוגעגרייט מאַטערials
רנאַסע-פריי פּייפּעט עצות, 1.5 מל רנאַסע-פריי סענטריפודזש טובז, סענטריפודזש, וואָרטעקס מיקסער און פּיפּעטטעס.
עקספּערימענט פּראָצעס
דורכפירן אַלע די פאלגענדע סטעפּס אין אַ ביאָסאַפעטי קאַבינעט.
1. לייג 200 μל פון די מוסטער צו אַ רנאַסע-פֿרייַ סענטריפודזש רער (מאַכן זיך מיט פּבס אָדער 0.9% נאַקל אין פאַל פון ניט גענוגיק מוסטער), לייגן 500 μל Buffer VL, מישן געזונט דורך וואָרטעקסינג פֿאַר 15 - 30 סעק, און סענטריפודזש בעקיצער צו זאַמלען די געמיש אין די דנאָ פון די רער.
2. שטעלן פאַסטפּורע רנאַ קאָלומנס אין אַ זאַמלונג טובז 2 מל.אַריבערפירן די געמיש פון סטעפּ 1 צו FastPure רנאַ קאָלומנס, סענטריפודזש ביי 12,000 רפּם (13,400 × ג) פֿאַר 1 מינוט, און אַוועקוואַרפן די פילטראַטע.
3. לייג 600 μל Buffer RW צו FastPure רנאַ קאָלומנס, סענטריפודזש ביי 12,000 רפּם (13,400 × ג) פֿאַר 30 סעק, און אַוועקוואַרפן די פילטראַטע.
4. איבערחזרן שריט 3.
5. סענטריפיודזש די ליידיק זייַל בייַ 12,000 רפּם (13,400 × ג) פֿאַר 2 מין.
6. קערפאַלי אַריבערפירן פאַסטפּורע רנאַ קאָלומנס אין אַ נייַ רנאַסע-פריי קאַלעקשאַן טובז 1.5 מל (צוגעשטעלט אין די קיט), און לייגן 30 - 50 μל פון רנאַסע-פֿרייַ דה2אָ צו די צענטער פון די מעמבראַנע אָן רירנדיק די זייַל.לאָזן שטיין אין צימער טעמפּעראַטור פֿאַר 1 מין און סענטריפודזש ביי 12,000 רפּם (13,400 × ג) פֿאַר 1 מין.
7. אַוועקוואַרפן פאַסטפּורע רנאַ קאָלומנס.די דנאַ / רנאַ קענען זיין געוויינט גלייַך פֿאַר סאַבסאַקוואַנט אַססעס, אָדער סטאָרד ביי -30 ~ -15 ° C פֿאַר אַ קורץ צייַט אָדער -85 ~ -65 ° C פֿאַר אַ מער צייט.
הערות
פֿאַר פאָרשונג נוצן בלויז.ניט פֿאַר נוצן אין דיאַגנאָסטיק פּראָוסידזשערז.
1. יקוואַליברייט סאַמפּאַלז צו צימער טעמפּעראַטור אין שטייַגן.
2. ווירוסעס זענען העכסט ינפעקטיאָוס.ביטע ענשור אַז אַלע נייטיק זיכערקייַט פּריקאָשאַנז זענען גענומען איידער דער עקספּערימענט.
3. ויסמיידן ריפּיטיד ייַז קאַלט און טאָינג פון די מוסטער, ווי דאָס קען פירן צו דערנידעריקונג אָדער רידוסט טראָגן פון די יקסטראַקטיד וויראַל דנאַ / רנאַ.
4. זיך-צוגעגרייט עקוויפּמענט כולל רנאַסע-פֿרייַ פּייפּעט עצות, 1.5 מל רנאַסע-פֿרייַ סענטריפודזש טובז, סענטריפודזש, וואָרטעקס מיקסער, און פּיפּעטטעס.
5. ווען איר נוצן דעם קיט, טראָגן אַ לאַב מאַנטל, דיספּאָוזאַבאַל לייטעקס גלאַווז, און אַ דיספּאָוזאַבאַל מאַסקע און נוצן רנאַסע-פֿרייַ קאָנסומאַבלעס צו מינאַמייז די ריזיקירן פון רנאַסע קאַנטאַמאַניישאַן.
6. דורכפירן אַלע סטעפּס אין צימער טעמפּעראַטור סייַדן אַנדערש ספּעסיפיעד.
מעקאַניזאַם און וואָרקפלאָוו
