מולטיפּלעקס איין סטעפּ RT-qPCR פּרעמיקס
באַשרייַבונג
קאַט נומ: HCR5141A
מולטיפּלעקס איין סטעפּ RT-qPCR פּרעמיקס איז אַ מולטיפּלעקס קוואַנטיטאַטיווע פּקר קיט באזירט אויף רנאַ ווי מוסטער.אין דער עקספּערימענט, פאַרקערט טראַנסקריפּציע און קוואַנטיטאַטיווע פּקר זענען דורכגעקאָכט אין דער זעלביקער אָפּרוף רער, סימפּלאַפייינג די יקספּערמענאַל אָפּעראַציע און רידוסינג די ריזיקירן פון קאַנטאַמאַניישאַן.די יינציק פּלאַן פון באַפער און ענזיים מישן קענען זיין געוויינט אין איין-שריט ליאָפיליזעד סיסטעם.די קיט ניצט היץ-קעגנשטעליק פאַרקערט טראַנסקריפּטאַסע פֿאַר עפעקטיוו סינטעז פון ערשטער שנירל קדנאַ ניצן האָטסטאַרט טאַק דנאַ פּאָלימעראַסע פֿאַר קוואַנטיטאַטיווע אַמפּלאַפאַקיישאַן.עס כּולל אָפּטימיזעד אָפּרוף באַפער, ענזימעס מישן עטק, און סיבות וואָס יפעקטיוולי ינכיבאַט ניט-ספּעציפיש פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן און פאַרבעסערן די אַמפּלאַפאַקיישאַן עפעקטיווקייַט פון קייפל qPCR ריאַקשאַנז זענען צוגעגעבן, אַלאַוינג קייפל פלואָרעססענסע קוואַנטיטאַטיווע אַמפּלאַפאַקיישאַן בשעת ינשורינג די אַמפּלאַפאַקיישאַן עפעקטיווקייַט פון פּרימערז.
קאַמפּאָונאַנץ
| נאָמען |
| 1. ליאָ-באַפער |
| 2. ליאָ-ענזיים מיקס |
| 3. ליאָ פּראָטעקטאַנט |
טראַנספּאָרטאַטיאָן צושטאַנדיאָן
א: ליאָ-באַפער און פּראַטעקטיוו: -25 ~ -15 ℃, פּאָליצע לעבן איז 1 יאָר.
ב: ליאָ-ענזיים מישן, 2-8 ℃, פּאָליצע לעבן איז 6 חדשים.
ינסטראַקשאַנז פֿאַר אָפּעראַציע
1. אָפּרוף סיסטעם (נעמען 25μ ל ווי בייַשפּיל)
| קאַמפּאָונאַנץ | באַנד (μL) | לעצט קאַנסאַנטריישאַן |
| ליאָ-באַפער | 6 | 1* |
| ליאָ-ענזיים מיקס | 1 | - |
| ליאָ-פּראָטעקטאַנט | 8 | - |
| אָנפאַנגער מיקס (10μם) | 1 | 0.1- 1וM |
| זאָנד מיקס (10μם) | 0.5 | 0.05-0.5וM |
| רנאַ מוסטער | 5 | - |
| DEPC H2O | אַרויף צו 25 | - |
2. אָפּטימיזעד סייקלינג פּראָטאָקאָל
1) נאָרמאַל סייקלינג פּראָטאָקאָל
| רעאַקציע בינע | טעמפּעראַטור | צייַט | ציקל | |
| 1 | פאַרקערט טראַנסקריפּציע | 50°Ca | 10מין | 1 |
| 2 | ערשט דענאַטוראַטיאָן | 95°C | 5מין | 1 |
| 3 | אַמפּלאַפאַקיישאַן אָפּרוף | 95°C | 15 סעק | 45 סייקאַלז |
| 60°Cb | 30 סעקc |
2) שנעל סייקלינג פּראָטאָקאָל
|
| רעאַקציע בינע | טעמפּעראַטור | צייַט | ציקל |
| 1 | פאַרקערט טראַנסקריפּציע | 50°Ca | 2מין | 1 |
| 2 | ערשט דענאַטוראַטיאָן | 95°C | 2 סעק | 1 |
| 3 | אַמפּלאַפאַקיישאַן אָפּרוף | 95°C | 1 סעק |
45 סייקאַלז |
| 60°Cb | 13 סעקc |
נאטיץ:
a) פאַרקערט טראַנסקריפּציע: די טעמפּעראַטור קענען אויסקלייַבן 42 ° C אָדער 50 ° C פֿאַר 10-15 מינוט.
b) אַמפּלאַפאַקיישאַן אָפּרוף: די טעמפּעראַטור איז אַדזשאַסטיד לויט די Tm ווערט פון די דיזיינד אָנפאַנגער.
ג)פלואָרעססענסע סיגנאַל אַקוואַזישאַן: ביטע שטעלן די יקספּערמענאַל פּראָצעדור לויט די באדערפענישן פון דיקיילע מאַנואַל.
טעכניש אינפֿאָרמאַציע / ספּעסאַפאַקיישאַנז
| הייס אָנהייב | געבויט-אין הייס אָנהייב |
| דעטעקשאַן אופֿן | אָנפאַנגער-זאָנד דיטעקשאַן |
| פּקר אופֿן | איין שריט RT-qPCR |
| טיפּ פון מוסטער | רנאַ |
הערות
1. דעם פּראָדוקט איז בלויז פֿאַר פאָרשונג נוצן.
2. ביטע טראָגן די נייטיק פּפּע, אַזאַ לאַב מאַנטל און גלאַווז, צו ענשור דיין געזונט און זיכערקייַט!
