דנאַסע איך (רנאַסע פריי) (5u/ul)
קאַט נומ: HC4007A
דנאַסע איך (דעאָקסיריבאָנוקלאַסע איך) איז אַן ענדאָדעאָקסיריבאָנוקלעאַסע וואָס קענען דיידזשעסטיד איין- אָדער טאָפּל סטראַנדיד דנאַ.עס אנערקענט און קלעאַוועס פאָספאָדיעסטער קייטן צו פּראָדוצירן מאָנאָדעאָקסינוקלעאָטידעס אָדער איין- אָדער טאָפּל-סטראַנדיד אָליגאָדעאָקסינוקלעאָטידעס מיט פאָספאַטע גרופּעס אין די 5'-וואָקזאַל און הידראָקסיל אין די 3'-וואָקזאַל.די טעטיקייט פון DNase I דעפּענדס אויף Ca2+און קענען זיין אַקטיווייטיד דורך דייוואַלאַנט מעטאַל ייאַנז אַזאַ ווי Mn2+און זן2+.5 מם Ca2+פּראַטעקץ די ענזיים פון כיידראַלאַסאַס.אין דעם בייַזייַן פון מג2+, דער ענזיים קען ראַנדאַמלי דערקענען און קלעאַווירן קיין פּלאַץ אויף קיין שנירל פון דנאַ.אין די בייַזייַן פון מנ2+, די טאָפּל סטראַנדז פון דנאַ קענען זיין סיימאַלטייניאַסלי דערקענט און קלעאַוועד אין כּמעט דער זעלביקער פּלאַץ צו פאָרעם פלאַך סוף דנאַ פראַגמאַנץ אָדער קלעפּיק סוף דנאַ פראַגמאַנץ מיט 1-2 נוקלעאָטידעס פּראָוטרודינג.
קאַמפּאָונאַנץ
נאָמען | 0.1KU | 1KU | 5 קו | 50 קו |
דנאַסע איך, רנאַסע-פֿרייַ | 20μל | 200μל | 1 מל | 10 מל |
10 × דנאַסע איך באַפער | 1 מל | 1 מל | 5 × 1 מל | 5 × 10 מל |
סטאָרידזש טנאָים
-25 ℃ ~ -15 ℃ פֿאַר סטאָרידזש;אַריבערפירן אונטער אייז פּאַקס.
אינסטרוקציעס
1. צוגרייטן די אָפּרוף לייזונג אין די רנאַסע-פֿרייַ רער לויט די פּראַפּאָרשאַנז ליסטעד אונטן:
קאָמפּאָנענט | באַנד |
רנאַ | X µg |
10 × דנאַסע איך באַפער | 1μל |
דנאַסע איך, רנאַסע-פריי (5 ו / μ ל) | 1 ו פּער μג רנאַ① |
ddH2O | אַרויף צו 10 μ ל |
באַמערקונג: ① רעכענען די באַנד פון דנאַסע איך וואָס דאַרף זיין צוגעגעבן באזירט אויף די סומע פון רנאַ.
2. 37 ℃ פֿאַר 15 מינוט;
3. לייג 0.5 ם עדטאַ צו די לעצט קאַנסאַנטריישאַן פון 2.5 מם ~ 5 מם, און היץ ביי 65 ℃ פֿאַר 10 מינוט צו האַלטן די אָפּרוף.דער מוסטער קענען זיין גלייך געניצט פֿאַר דער ווייַטער אָפּרוף אַזאַ ווי פאַרקערט טראַנסקריפּציעעקספּערימענט.
אַפּאַראַט דעפֿיניציע
איין אַפּאַראַט איז דיפיינד ווי די סומע פון ענזיים וואָס וועט גאָר דיגרייד 1 μג פון pBR322דנאַ אין 10 מינוט בייַ 37 ℃.
קוואַליטעט קאָנטראָל
RNase:5U פון דנאַסע איך מיט 1.6 μג MS2 רנאַ פֿאַר 4 שעה ביי 37 ℃ ייעלדס קיין דערנידעריקונג וויבאשלאסן דורך אַגאַראָסע געל עלעקטראָפאָרעסיס.
הערות
1. ביטע צוגרייטן 0.5מעדטאַ דורך זיך.
2. ניצן 1U דנאַסע איך פּער μג פון רנאַ.אָבער, אויב די רנאַ איז ווייניקער ווי 1 μg, ביטע נוצן 1U DNase I.
3. ביטע שטעלן די ענזיים אויף אייז בעשאַס אָפּעראַציע.