CHO HCP ELISA Kit
א איין-שריט ימיונאָסאָרבענט עליסאַ אופֿן איז געניצט אין דעם אַסעס.סאַמפּאַלז מיט CHOK1 HCP סיימאַלטייניאַסלי רעאַגירן מיט HRP-לייבאַלד ציג אַנטי-CHOK1 אַנטיבאָדי און אַנטי-CHOK1 אַנטיבאָדי קאָוטאַד אויף די ELISA טעלער, לעסאָף פאָרמינג אַ סענדוויטש קאָמפּלעקס פון האַרט-פאַסע אַנטיבאָדי-הקפּ-לייבאַלד אַנטיבאָדי.אַנבאַונד אַנטיגען-אַנטיבאָדי קענען זיין אַוועקגענומען דורך וואַשינג די עליסאַ טעלער.די TMB סאַבסטרייט איז מוסיף צו די געזונט פֿאַר גענוג אָפּרוף.די קאָליר אַנטוויקלונג איז סטאַפּט נאָך אַדינג די האַלטן לייזונג, און די אָד אָדער אַבזאָרבאַנס ווערט פון די אָפּרוף לייזונג ביי 450/650 נם איז לייענען מיט אַ מיקראָפּלאַטע לייענער.די אָד ווערט אָדער אַבזאָרבאַנס ווערט איז פּראַפּאָרשאַנאַל צו די HCP אינהאַלט אין די לייזונג.פֿון דעם, די HCP קאַנסאַנטריישאַן אין די לייזונג קענען זיין קאַלקיאַלייטיד לויט די נאָרמאַל ויסבייג.
אַפּפּליקאַטיאָן
דעם קיט איז געניצט צו קוואַנטיטאַטיוועלי דעטעקט די אינהאַלט פון CHOK1 באַלעבאָס צעל פּראָטעין רעזאַדוז אין סאַמפּאַלז.
Cבאאמטע
| S/N | קאָמפּאָנענט | קאָנצענטראַציע | סטאָרידזש טנאָים |
| 1 | CHOK1 HCP סטאַנדאַרד | 0.5 מג / מל | ≤–20℃ |
| 2 | אַנטי-CHO HCP-HRP | 0.5 מג / מל | ≤–20℃, באַשיצן פון ליכט |
| 3 | TMB | NA | 2-8 ℃, באַשיצן פון ליכט |
| 4 | 20 × PBST 0.05% | NA | 2-8℃ |
| 5 | האַלטן לייזונג | NA | RT |
| 6 | מיקראָפּלאַטע סילערז | NA | RT |
| 7 | BSA | NA | 2-8℃ |
| 8 | הויך אַדסאָרפּטיאָן פאַר-קאָוטינג פּלאַטעס | NA | 2-8℃ |
עקוויפּמענט פארלאנגט
| קאָנסומאַבלעס / ויסריכט | פּראָדוצירן | קאַטאַלאָג |
| מיקראָפּלאַטע לייענער | מאָלעקולאַר דעוויסעס | ספּעקטראַ מאַקס M5, M5e אָדער עקוויוואַלענט |
| טערמאָמיקסער | Eppendorf | Eppendorf/5355, אָדער עקוויוואַלענט |
| וואָרטעקס מיקסער | IKA | MS3 דיגיטאַל, אָדער עקוויוואַלענט |
סטאָרידזש און פעסטקייַט
1.אַריבערפירן ביי -25~-15°C.
2.סטאָרידזש טנאָים זענען ווי געוויזן אין טאַבלע 1;קאַמפּאָונאַנץ 1-2 זענען סטאָרד ≤–20 °C, 5-6 זענען סטאָרד רט,3、4, 7, 8 זענען סטאָרד בייַ 2-8 ℃;די גילטיקייַט צייַט איז 12 חדשים.
פּראָדוקט פּאַראַמעטערס
1.סענסיטיוויטי: קסנומקסנג / מל
2.דיטעקשאַן קייט: 3-100נג / מל
3.פּינטלעכקייַט: ינטראַ-אַסיי קוו≤ 10%, ינטער-אַסיי קוו≤ 15%
4.HCP קאַווערידזש:>80%
5.ספּעציפֿישקייט: דעם קיט איז וניווערסאַל ווייַל עס ספּאַסיפיקלי ריאַקץ מיט CHOK1 HCP פרייַ פון רייניקונג פּראָצעס.
רעאַגענט צוגרייטונג
1.PBST 0.05%
נעמען 15 מל פון 20 × פּבסט 0.05%, דיילוטאַד אין דדה2אָ, און געמאכט אַרויף צו 300 מל.
2.1.0% BSA
נעמען 1 ג פון BSA פון די פלאַש און צעפירן אין 100 מל פון PBST 0.05%, מישן געזונט ביז גאָר צעלאָזן, און קראָם ביי 2-8 ° C.דער צוגעגרייט דיילושאַן באַפער איז גילטיק פֿאַר 7 טעג.עס איז רעקאַמענדיד צו צוגרייטן ווי דארף.
3.דעטעקשאַן לייזונג 2μג/מל
נעמען 48μל פון 0.5 מג / מל אַנטי-CHO HCP-HRP און צעפירן אין 11,952μל פון 1% BSA צו באַקומען אַ לעצט קאַנסאַנטריישאַן פון 2μג / מל דיטעקשאַן לייזונג.
4.QC און צוגרייטונג פון CHOK1 HCP סטאַנדאַרדס
| רער ניין. | אָריגינעל | קאָנצענטראַציע | באַנד | 1% בסאַ | גאַנץ באנד | לעצטגילטיק |
| A | נאָרמאַל | 0.5 מג / מל | 10 | 490 | 500 | 10,000 |
| B | A | 10,000 | 50 | 450 | 500 | 1,000 |
| S1 | B | 1.000 | 50 | 450 | 500 | 100 |
| S2 | S1 | 100 | 300 | 100 | 400 | 75 |
| S3 | S2 | 75 | 200 | 175 | 375 | 40 |
| S4 | S3 | 40 | 150 | 350 | 500 | 12 |
| S5 | S4 | 12 | 200 | 200 | 400 | 6 |
| S6 | S5 | 6 | 200 | 200 | 400 | 3 |
| NC | NA | NA | NA | 200 | 200 | 0 |
| QC | S1 | 100 | 50 | 200 | 250 | 20 |
טיש: צוגרייטונג פון קק און סטאַנדאַרדס
אַססייַ פּראָצעדור
1.צוגרייטן די רייידזשאַנץ ווי אנגעוויזן אין "רעאַגענט צוגרייטונג" אויבן.
2.נעמען 50 μ ל סטאַנדאַרדס, סאַמפּאַלז און קקס (אָפּשיקן צו טאַבלע 3) אין יעדער געזונט, און לייגן 100 μ ל דעטעקשאַן לייזונג (2 μ ג / מל);קאָווער טעלער מיט סילער, און שטעלן די עליסאַ טעלער אויף די טערמאַמיקסער.ינגקיובייט ביי 500 רפּם, 25 ± 3 ℃ פֿאַר 2 שעה.
3.יבערקערן די מיקראָפּלאַטע אין די זינקען און אַוועקוואַרפן די קאָוטינג לייזונג.פּיפּעטט 300μל PBST 0.05% אין יעדער געזונט צו וואַשן די עליסאַ טעלער און אַוועקוואַרפן די לייזונג, און איבערחזרן די וואַשינג 3 מאל.יבערקערן די טעלער אויף אַ ריין פּאַפּיר האַנטעך און פּונקט טרוקן.
4.לייג 100 μ ל טמב סאַבסטרייט (זען טאַבלע 1) צו יעדער געזונט, פּלאָמבע די עליסאַ טעלער און ינקובייט אין דער פינצטער בייַ 25 ± 3 ℃ פֿאַר 15 מינוט.
5.פּיפּעטט 100μל פון האַלטן לייזונג אין יעדער געזונט.
6.מעסטן אַבזאָרפּשאַן ביי ווייוולענגט פון 450/650 נם מיט מיקראָפּלאַטע לייענער.
7.פונאַנדערקלייַבן דאַטן דורך סאָפטמאַקס אָדער עקוויוואַלענט ווייכווארג.פּלאַנעווען נאָרמאַל ויסבייג מיט אַ פיר-פּאַראַמעטער לאָגיסטיק ראַגרעשאַן מאָדעל.
נאָרמאַל קורווע בייַשפּיל
נאָטיץ: אויב די קאַנסאַנטריישאַן פון HCP אין דער מוסטער יקסידז דער אויבערשטער שיעור פון די נאָרמאַל ויסבייג, עס דאַרף זיין דיילוטאַד מיט דיילושאַן באַפער איידער טעסטינג.
הערות
די האַלטן לייזונג איז 2 ם סאַלפיוריק זויער, ביטע שעפּן מיט זאָרג צו ויסמיידן ספּלאַשינג!
