רט-לאַמפּ קאָלאָרמעטריק האר מיקס HCB5204A
דער פּראָדוקט כּולל אָפּרוף באַפער, רט-ענזימעס מיקס (בסט דנאַ פּאָלימעראַסע און היץ-קעגנשטעליק פאַרקערט טראַנסקריפּטאַסע), ליאָפילייזד פּראָטעקטאַנץ און טשראָמאָגעניק פאַרב קאַמפּאָונאַנץ.צו נוצן, נאָר נוצן Buffer, דער אָפּרוף ענזיים און אָנפאַנגער זענען געמישט און צוגעגעבן צו די מוסטער;אַדינג ליאָפיליזעד פּראַטעקטיוו קענען זיין גלייַך.עס איז געווען פארבונדן צו אַ ליאָפיליזער און ליאָפיליזעד, און בלויז די אָנפאַנגער און טעמפּלאַטעס זענען צוגעגעבן ווען געוויינט.דעם קיט גיט אַ שנעל, קלאָר וויזשאַוואַל דיטעקשאַן פון אַמפּלאַפאַקיישאַן, וואָס נעגאַטיוו אָפּרוף איז אנגעוויזן אין רויט און positive אָפּרוף איז ינדיקייטאַד דורך אַ ענדערונג צו געל.
קאָמפּאָנענט
| קאָמפּאָנענט | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| שלייף-מעדיאַטעד אַמפּלאַפאַקיישאַן באַפער (מיט פאַרב) | 0.96 מל | 4.80 מל × 2 | 9.60 מל × 10 |
| רט-ענזימעס מיקס | 270 μל | 2.70 מל | 2.70 מל × 10 |
| ליאָפיליזעד פּראַטעקטיוו | 0.96 מל × 2 | 9.60 מל × 2 | 9.60 מל × 20 |
אַפּפּליקאַטיאָנס
פֿאַר דנאַ אָדער רנאַ יסאָטהערמאַל אַמפּלאַפאַקיישאַן.
סטאָרידזש טנאָים
טראַנספּאָרטאַד מיט טרוקן ייַז, סטאָרד ביי -25 ~ -15 ℃.ויסמיידן אָפט פרירן-טאָ, די פּראָדוקט איז גילטיק פֿאַר 12 חדשים.
פּראָטאָקאָל
1.טאָ די אָפּרוף באַפער צו זיין געניצט אין צימער טעמפּעראַטור.וואָרטעקס בעקיצער אָדער יבערקערן טובז עטלעכע מאל צו מישן ונ דורך, דעמאָלט סענטריפודזש צו זאַמלען די פליסיק צו די דנאָ פון די רער.
2.צוגרייטונג פון אָפּרוף סיסטעם.דער רייידזשאַנט קענען זיין צוגעגרייט אין צוויי אָפּרוף סיסטעמען, פליסיק אָפּרוף מישן און ליאָפיליזעד סיסטעם מישן.
1) צוגרייטן פליסיק אָפּרוף מישן
| קאָמפּאָנענט | באַנד |
| שלייף-מעדיאַטעד אַמפּלאַפאַקיישאַן באַפער (מיט פאַרב) | 10 μל |
| רט-ענזימעס מיקס | 2.8 μל |
| 10 × אָנפאַנגער מיקסa | 5 μL |
| דנאַ / רנאַ טעמפּלאַטעס b | × μל |
| נוקלעאַסע-פֿרייַ וואַסער | אַרויף צו 50 μ ל |
2) ליאָפיליזאַטיאָן סיסטעם מישן
① צוגרייטן ליאָפיליזעד מישן
| קאָמפּאָנענט | באַנד |
| שלייף-מעדיאַטעד אַמפּלאַפאַקיישאַן באַפער (מיט פאַרב) | 10 μל |
| ליאָפיליזעד פּראַטעקטיוו | 20 μל |
| רט-ענזימעס מיקס | 2.8 μל |
| נוקלעאַסע-פֿרייַ וואַסער | אַרויף צו 50 μ ל |
② ליאָפיליזאַטיאָן: די צוגעגרייט מיקס איז ליאָפילייזד אין אַ 50 μ ל סיסטעם
③ צוגרייטן אָפּרוף מישן
| קאָמפּאָנענט | באַנד |
| ליאָפיליזעד מישן | 1 שטיק |
| 10 × אָנפאַנגער מיקסa | 5 μL |
| דנאַ / רנאַ טעמפּלאַטעס b | × μל |
| נוקלעאַסע-פֿרייַ וואַסער | אַרויף צו 50 μ ל |
הערות:
1 ) א .10 × אָנפאַנגער מיקס: 16 μM FIP / BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B;
2 ) ב.דעפּק (וואַסער סאַליאַבאַל) איז רעקאַמענדיד פֿאַר נוקלעיק זויער טעמפּל.
1.ינגקיובייט בייַ 65 ° C פֿאַר 30-45 מינוט, וואָס קענען זיין עקסטענדעד אַפּראָופּרייטלי לויט צו קאָליר טוישן רעאַקטיאָן צייט.
2.לויט די נאַקעט אויג, געל איז געווען positive און רויט איז נעגאַטיוו.
הערות
1.זאַלץ קען דערשייַנען אין די דנאָ פון די באַפער רער, וואָרטעקס בעקיצער אָדער יבערקערן טובז עטלעכע מאָל צו מישן ונ דורך אין צימער טעמפּעראַטור.
2.דער אָפּרוף טעמפּעראַטור קענען זיין אָפּטימיזעד צווישן 62 ℃ און 68 ℃ לויט די צושטאַנד פון אָנפאַנגער.
3.די פּאַקידזשד רייידזשאַנץ זאָל נישט זיין יקספּאָוזד צו לופט פֿאַר אַ לאַנג צייַט.
4.די רויט און געל דיסקאַלעריישאַן אָפּרוף דעפּענדס אויף די ף ענדערונג פון די אָפּרוף סיסטעם, ביטע טאָן ניט נוצן די מיט Tris נוקלעיק זויער סטאָרידזש לייזונג, רעקאַמענדיד צו נוצן DDH2אָ סטאָרד נוקלעיק זויער;
5.דער עקספּערימענט זאָל זיין סטאַנדערדייזד, אַרייַנגערעכנט די צוגרייטונג פון די אָפּרוף סיסטעם, ליאָפיליזאַטיאָן און מוסטער פּראַסעסינג און מוסטער אַדינג פּראָצעס;
6.צו ויסמיידן קאַנטאַמאַניישאַן, עס איז רעקאַמענדיד צו צוגרייטן די אָפּרוף סיסטעם אין אַ הינטער-ריין באַנק, אין אנדערע לייג טעמפּלאַטעס צו די רויך קאַפּטער פון די צימער צו ויסמיידן פאַלש positive ינטערפיראַנס.
