DNase I
דנאַסע איך (דעאָקסיריבאָנוקלאַסע איך) איז אַן ענדאָדעאָקסיריבאָנוקלעאַסע וואָס קענען דיידזשעסטיד איין- אָדער טאָפּל סטראַנדיד דנאַ.עס אנערקענט און קלעאַוועס פאָספאָדיעסטער קייטן צו פּראָדוצירן מאָנאָדעאָקסינוקלעאָטידעס אָדער איין- אָדער טאָפּל-סטראַנדיד אָליגאָדעאָקסינוקלעאָטידעס מיט פאָספאַטע גרופּעס אין די 5'-וואָקזאַל און הידראָקסיל אין די 3'-וואָקזאַל.די טעטיקייט פון דנאַסע איך דעפּענדס אויף Ca2+ און קענען זיין אַקטיווייטיד דורך דייוואַלאַנט מעטאַל ייאַנז אַזאַ ווי Mn2+ און Zn2+.5 מם קאַ2+ פּראַטעקץ די ענזיים פון כיידראַלאַסאַס.אין דעם בייַזייַן פון Mg2+, די ענזיים קען ראַנדאַמלי דערקענען און קלעאַווירן קיין פּלאַץ אויף קיין שנירל פון דנאַ.אין דעם בייַזייַן פון Mn2 +, די טאָפּל סטראַנדז פון דנאַ קענען זיין סיימאַלטייניאַסלי דערקענט און קלעאַוועד אין כּמעט די זעלבע פּלאַץ צו פאָרעם פלאַך סוף דנאַ פראַגמאַנץ אָדער קלעפּיק סוף דנאַ פראַגמאַנץ מיט 1-2 נוקלעאָטידעס פּראָוטרודינג.
פּראָדוקט פאַרמאָג
באָווין פּאַנקרעאַס דנאַסע איך איז געווען אויסגעדריקט אין הייוון אויסדרוק סיסטעם און פּיוראַפייד.
Cבאאמטע
| קאָמפּאָנענט | באַנד | |||
| 0.1KU | 1KU | 5KU | 50KU | |
| דנאַסע איך, רנאַסע-פֿרייַ | 20μל | 200μל | 1 מל | 10 מל |
| 10 × דנאַסע איך באַפער | 1 מל | 1 מל | 5 × 1 מל | 5 × 10 מל |
טראַנספּאָרטאַטיאָן און סטאָרידזש
1. סטאָרידזש פעסטקייַט: -15℃ ~-25℃ פֿאַר סטאָרידזש;
2.טראַנספּאָרט סטאַביליטי: אַריבערפירן אונטער ייַז פּאַקס;
3. סאַפּלייד אין: 10 מם טריס-הקל, 2 מם קאַקל250% גליסעראָל, ף 7.6 ביי 25 ℃.
אַפּאַראַט דעפֿיניציע
איין אַפּאַראַט איז דיפיינד ווי די סומע פון ענזיים וואָס וועט גאָר דיגרייד 1 μג פון pBR322 דנאַ אין 10 מינוט ביי 37 ° C.
קוואַליטעט קאָנטראָל
RNase:5U פון דנאַסע איך מיט 1.6 μג MS2 רנאַ פֿאַר 4 שעה ביי 37 ℃ ייעלדס קיין דערנידעריקונג ווי באשלאסן דורך אַגאַראָסע געל עלעקטראָפאָרעסיס.
באַקטיריאַל ענדאָטאָקסין:LAL-טעסט, לויט כינעזיש פאַרמאַקאָפּאָעיאַ יוו 2020 אַדישאַן, געל לימיט פּרובירן אופֿן, אַלגעמיין הערשן (1143).ענדאָטאָקסין אינהאַלט פון באַקטיריאַ זאָל זיין ≤10 אי.יו. / מג.
ינסטראַקשאַנז פֿאַר נוצן
1.פּרעפּאַרע די אָפּרוף לייזונג אין די רנאַסע-פֿרייַ רער לויט די פּראַפּאָרשאַנז ליסטעד אונטן:
| קאָמפּאָנענט | באַנד |
| רנאַ | X μג |
| 10 × דנאַסע איך באַפער | 1 μל |
| דנאַסע איך, רנאַסע-פריי (5 ו / μ ל) | 1 ו פּער μג רנאַ |
| ddH2O | אַרויף צו 10 μל |
2.37 ℃ פֿאַר 15 מינוט;
3. לייג די טערמאַניישאַן באַפער צו האַלטן די אָפּרוף, און היץ ביי 65 ℃ פֿאַר 10 מינוט צו ינאַקטיווייט דנאַסע י. דער מוסטער קענען זיין גלייך געניצט פֿאַר דער ווייַטער טראַנסקריפּציע עקספּערימענט.
הערות
1.Use 1U DNase I פּער μג פון רנאַ, אָדער 1U DNase I פֿאַר ווייניקער ווי 1μג פון רנאַ.
2.EDTA זאָל זיין מוסיף צו אַ לעצט קאַנסאַנטריישאַן פון 5 מם צו באַשיצן רנאַ פון דיגריידיד בעשאַס ענזיים ינאַקטיוויישאַן.
