BsaI ריסטריקשאַן ענדאָנוקלעאַסע
באַשרייַבונג
די BsaI ריסטריקשאַן ענזיים איז אַ טיפּ II ריסטריקשאַן ענדאָנוקלעאַסע דערייווד פון די רעקאָמבינאַנט פּראָטעין קאָדעד דורך די BspQI דזשין אין Bacillus sphaericus אויסגעדריקט דורך E.coli.ריסטריקשאַן ענדאָנוקלעאַסעס זענען וויידלי געניצט אין דזשין מאַפּינג, קלאָונינג און אנדערע פעלדער.דעם ענזיים ראַפּאַדלי שנייַדן דנאַ פֿאַר עפעקטיוו דזשין לינעאַריזאַטיאָן Bsa I, אַן IIs ריסטריקשאַן ענדאָנוקלעאַסע ריסטריקשאַן ענדאָנוקלעאַסע, איז דערייווד פון אַ רעקאָמבינאַנט E. קאָלי שפּאַנונג וואָס קאַריז די קלאָונד און מאַדאַפייד BsaI דזשין פון Bacillus stearothermophilus.וואָס האָבן די זעלבע ספּעסיפיקאַטי ווי געבוירן ענזימעס און רידוסט שטערן טעטיקייט.זייַן דערקענונג סיקוואַנס און קלעאַוואַגע זייטלעך זענען ווי גייט:
5'······גגטקטק(נ)······ ··3'
3'······CCAGAG(NNNNN)·······5'
כעמישער סטרוקטור
פּראָדוקט פֿעיִקייטן
• די ריסטריקשאַן ענדאָנוקלעאַסע האט הויך ענזימאַטיק טעטיקייט און קאַמפּליץ דיידזשעסטשאַן אָפּרוף געשווינד.
• נידעריק ניט-ספּעציפיש ענדאָנוקלעאַסע טעטיקייט צו ענשור גענוי "סקאַלפּעל" קאַטינג.
• קיין BSA סיסטעם, רידוסינג היץ מקור פאַרפּעסטיקונג.
ספּעציפיקאַציע
| טעסט יטעמס | ספּעסאַפאַקיישאַנז |
| ענזיים אַקטיוויטעט | 20 ו/μ ל |
| ריינקייַט (SDS-PAGE) | ≥95% |
| רנאַסע | קיינער דיטעקטאַד |
| ניט-ספּעציפיש דנאַסע אַקטיוויטעט | ניט דיטעקטאַד |
| שטערן אַקטיוויטעט | ניט דיטעקטאַד |
| לאַגיישאַן און רעקאַטינג | נאָך דיידזשעסטשאַן, דנאַ פראַגמאַנץ קענען זיין ליגייטיד.און די ליגאַטעד פראַגמאַנץ קענען זיין ריטשערד מיט בסל. |
| ענדאָטאָקסינס (LAL-טעסט) | ≤10 אי.יו./מג |
| ע.קאָלי דנאַ | ≤1 קאָפּיע/2U |
קוואַליטעט קאָנטראָל
ריינקייַט ≥ 95%, קיין דנאַסע, רנאַסע טעטיקייט, האָסט דנאַ רעזאַדו ≤ 100פּג/מג, באַלעבאָס פּראָטעין רעזאַדו ≤ -50פּפּם, ענדאָטאָקסין רעזאַדו ≤ 10EU/mg, קיין פּראָטעאַסע טעטיקייט, סטערילע, פריי פון מיקאָפּלאַסמאַ
אַפּפּליקאַטיאָן
דיידזשעסט די פּלאַסמיד צו צוגרייטן אַ לינעאַרייזד דנאַ פראַגמענט אין די סוף פון פּאָלי (א / ה / C / ג);
לינעאַריזע פּלאַסמיד מוסטער איידער אין וויטראָ טראַנסקריפּציע;
ריסטריקשאַן דיידזשעסטשאַן;
אַפּאַראַט דעפֿיניציע
איין אַפּאַראַט איז דיפיינד ווי די סומע פון ענזיים פארלאנגט צו דיידזשעסטיד 1 μג פון אינערלעכער קאָנטראָל דנאַ אין 1 שעה ביי 37 ° C אין אַ גאַנץ אָפּרוף באַנד פון 50 μL
טראַנספּאָרטאַטיאָן און סטאָרידזש
טראנספארטאציע:שיפּט אונטער -15 °C
סטאָרידזש:קראָם בייַ -25 ~ -15 ° C
רעקאָממענדעד שייַעך-פּרובירן לעבן:1 יאָר
